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紫外可見分光光度計(jì)如何進(jìn)行校準(zhǔn)

  • 更新時(shí)間2024-08-27
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  紫外可見分光光度計(jì)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的精密分析儀器,它能夠測(cè)量樣品在紫外和可見光譜區(qū)域內(nèi)的吸收或透射特性。校準(zhǔn)是確保分光光度計(jì)測(cè)量準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟,以下是關(guān)于紫外可見分光光度計(jì)校準(zhǔn)方式的描述:
  1. 選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
  - 標(biāo)準(zhǔn)溶液:選擇與儀器波長(zhǎng)范圍相匹配的標(biāo)準(zhǔn)溶液,如在紫外區(qū)域常用的硝酸鉀溶液,在可見區(qū)域常用的重鉻酸鉀溶液。
  - 純度要求:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)具有高純度,以減少雜質(zhì)對(duì)校準(zhǔn)結(jié)果的影響,并確保其穩(wěn)定性和可追溯性。
  2. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)溶液
  - 準(zhǔn)確稱量:使用精密天平準(zhǔn)確稱量所需標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并按照推薦濃度準(zhǔn)確配制溶液。
  - 適宜溶劑:選擇適宜的溶劑溶解標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),確保溶劑對(duì)測(cè)定無干擾,并保證溶液的穩(wěn)定性。
  3. 檢查儀器性能
  - 光源檢查:確保儀器光源穩(wěn)定,對(duì)于使用氘燈和鎢燈的分光光度計(jì),檢查燈源是否穩(wěn)定,并確保燈源壽命足夠。
  - 光路清潔:檢查儀器光路是否清潔,鏡片、分光器等光學(xué)元件表面無塵埃、污漬。
  4. 波長(zhǎng)校準(zhǔn)
  - 使用標(biāo)準(zhǔn)燈:利用具有特征發(fā)射譜線的標(biāo)準(zhǔn)燈(如汞燈、氘燈),進(jìn)行波長(zhǎng)的準(zhǔn)確性校準(zhǔn)。
  - 校正偏移:如果檢測(cè)到波長(zhǎng)偏移,應(yīng)根據(jù)儀器說明書調(diào)整波長(zhǎng)刻度,確保波長(zhǎng)讀數(shù)的準(zhǔn)確性。
  5. 光度準(zhǔn)確度校準(zhǔn)
  - 透光率校準(zhǔn):使用透光率接近100%的樣品(如純凈溶劑)進(jìn)行基線校正,確保透光率讀數(shù)的準(zhǔn)確性。
  - 吸光度校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行吸光度校準(zhǔn),調(diào)整儀器的吸光度讀數(shù),使其與標(biāo)準(zhǔn)溶液的已知吸光度一致。
  6. 基線穩(wěn)定性檢查
  - 基線漂移:在沒有樣品的情況下,全波段掃描,檢查基線是否平穩(wěn),若基線漂移過大,需檢查儀器性能。
  - 溫度影響:確保儀器所在環(huán)境溫度穩(wěn)定,因?yàn)闇囟炔▌?dòng)可能導(dǎo)致基線漂移。
  7. 重復(fù)性和線性檢查
  - 重復(fù)性測(cè)試:多次測(cè)量同一標(biāo)準(zhǔn)溶液,檢查測(cè)量結(jié)果的重復(fù)性,確保儀器的測(cè)量精度。
  - 線性范圍:使用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,檢查儀器在不同濃度下的線性響應(yīng),確保儀器在整個(gè)測(cè)量范圍內(nèi)的線性。
  8. 記錄和驗(yàn)證
  - 詳細(xì)記錄:記錄校準(zhǔn)過程中的所有操作,包括標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、校準(zhǔn)結(jié)果、儀器參數(shù)的調(diào)整等。
  - 驗(yàn)證效果:校準(zhǔn)后,使用獨(dú)立來源的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行驗(yàn)證,確保校準(zhǔn)效果滿足測(cè)量要求。
  9. 定期再校準(zhǔn)
  - 定期執(zhí)行:根據(jù)儀器使用頻率和制造商建議,定期進(jìn)行校準(zhǔn),確保儀器始終處于最佳狀態(tài)。
  - 遇到問題時(shí):若發(fā)現(xiàn)測(cè)量結(jié)果異?;蜻M(jìn)行了重大維修,應(yīng)立即進(jìn)行再校準(zhǔn)。

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